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細(xì)胞分選試劑的配置有幾種

更新時間:2023-08-16      點(diǎn)擊次數(shù):777
  細(xì)胞分選試劑配置涉及到一系列用于細(xì)胞分選和分離的試劑和緩沖液,包括常用的試劑和其配制方法。
  緩沖液的配制:
  磷酸鹽緩沖液(PBS):
  配方:137 mM NaCl、2.7 mM KCl、10 mM Na2HPO4、1.8 mM KH2PO4。
  將上述化合物按照配方稱取后,加入適量的去離子水溶解,并用鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié) pH 值至7.4,最后用去離子水定容至適量。
  細(xì)胞培養(yǎng)基:
  細(xì)胞培養(yǎng)基的配方視實(shí)驗(yàn)需求而定,可以選擇 DMEM、RPMI-1640、MEM 等常用培養(yǎng)基。根據(jù)廠家提供的配方,按比例混合培養(yǎng)基粉末與適量的去離子水,并用 pH 調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié) pH 值至適宜范圍,最后用去離子水定容至適量。
  標(biāo)記抗體的配制:
  標(biāo)記抗體通常需要進(jìn)行稀釋或標(biāo)記染料。具體的配制方法會根據(jù)抗體或染料的性質(zhì)有所不同。大多數(shù)情況下,抗體或染料會附帶說明書,其中包含了建議的稀釋比例和基本的標(biāo)記方法。根據(jù)說明書的建議進(jìn)行稀釋和標(biāo)記即可。
  細(xì)胞溶解液和洗滌緩沖液的配制:
  細(xì)胞溶解液:
  細(xì)胞溶解液的配制方法因?qū)嶒?yàn)?zāi)康亩悺3R姷募?xì)胞裂解液包括 RIPA 緩沖液、NP-40 緩沖液、細(xì)胞裂解液等。可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求和相關(guān)文獻(xiàn)提供的方法進(jìn)行配制。
  洗滌緩沖液:
  洗滌緩沖液用于洗滌分選后的細(xì)胞,以去除殘留的細(xì)胞培養(yǎng)基、血清等。常用的洗滌緩沖液是 PBS 或 TBS 緩沖液。也可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求和相關(guān)文獻(xiàn)提供的方法進(jìn)行配制。
  緊密聯(lián)結(jié)試劑配制:
  緊密聯(lián)結(jié)試劑(例如 DAPI)用于染色并識別細(xì)胞核。具體的配制方法會根據(jù)試劑的性質(zhì)有所不同,通常會附帶說明書,其中包含了建議的稀釋比例和使用方法。根據(jù)說明書的建議進(jìn)行稀釋即可。
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