葡萄糖6磷酸(6PG)測試盒

微量法 100管/48樣

正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義：

 6PG (Glucose-6-phosphate，葡萄糖-6-磷酸，又稱6-磷酸葡萄糖)，是糖酵解和磷酸戊糖途徑的中間產物，廣泛存在于動植物體和微生物中。在糖酵解的第一步反應中，葡萄糖被己糖激酶催化生成葡萄糖-6-磷酸，然后通過磷酸葡萄糖異構酶的催化形成果糖-6-磷酸，以繼續糖酵解的其它步驟；而在戊糖磷酸途徑中，葡萄糖-6-磷酸是其第一個底物，該過程也是生成NADPH的主要途徑。此外，葡萄糖-6-磷酸也能轉化形成糖原或淀粉而被儲存起來。

測定原理：

6-磷酸葡萄糖脫氫酶可催化6PG和NADP+生成6磷酸葡萄糖酸和NADPH，NADPH在1-mPMS的作用下使WST-8顯橙黃色，在450 nm下測定吸光值。

需自備的儀器和用品：

酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、96孔板、研缽、冰、蒸餾水。

試劑的組成和配制：

提取液：液體60 mL×1瓶，4℃保存；

試劑一：液體12mL×1瓶， 4℃保存；

試劑二：粉劑×1瓶，-20℃保存；

試劑三：液體1.5mL×1管， 4℃避光保存。

6PG提?。?/p>

1、細菌或培養細胞：先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞數量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液），超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）， 8000g，25℃離心10min，取上清待測。

2、組織：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進行冰浴勻漿，8000g，25℃離心10min，取上清待測。

3、血清（漿）等液體樣品：直接測定。

測定步驟：

1、酶標儀預熱30min以上，調節波長至450nm。

2、試劑二的配制：臨用前加入3mL水充分溶解待用，用不完的試劑分裝后-20℃保存；

3、工作液的配制：臨用前按照樣本數量，按以下比例配制工作液

4. 樣本測定

按下表在96孔板中加入如下試劑

37℃避光孵育30min，450nm下測定吸光值A測定與A對照，△A=A測定-A對照。每個測定管需設一個對照管。

6PG含量計算：

1、標準條件下測定回歸方程為y = 3.8589x - 0.0016，R2 = 0.997； x為6PG含量（μmol/mL），y為吸光值。

2、按照血清（漿）體積計算

6PG含量（nmol/mL）= [(△A+0.0016)÷3.8589×V1]÷V1×1000

=259.1×(△A+0.0016)

3、按照蛋白濃度計算

6PG含量（nmol/mg prot）= [(△A+0.0016)÷3.8589×V1]÷(V1×Cpr)×1000

=259.1×(△A+0.0016) ÷Cpr

4、按照樣品質量計算

6PG含量（nmol/g鮮重）= [(△A+0.0016)÷3.8589×V1]÷(W ×V1÷V2）×1000

=259.1×(△A+0.0016) ÷W

3、按照細菌或細胞密度計算

6PG含量（nmol/104 cell）= [(△A+0.0016)÷3.8589×V1]÷（500×V1÷V2）×1000

=0.518×(△A+0.0016)

V1：加入反應體系中樣本體積，0.05mL；V2：加入提取液體積，1 mL； Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本質量，g；500：細菌或細胞總數，500萬；1000，μmol到nmol的換算系數。

上海牧榮生物科技有限公司

1. 國內試劑耗材經銷代理。

2. 國外試劑的訂購?？商峁W美實驗室品牌的采購方案。

3. 提供加急物流處理，進口貨物，最快交期1-2周。

4. 進出口貨物代理服務。

5. 公司代理眾多有名生命科學領域的研究試劑、儀器和實驗室消耗品品牌：CELL DATA,Alamanda Polymers， cstti，Click Chemistry tools，Nanoprobes，Ancell，NANOCS，Ambeed, Inc，SPEED BioSystems, LLC，Tulip Biolabs, Inc，Torrey Pines Biolabs，magsphere ,FabGennix International ,paratechs，Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重點合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

6. 質量保證，所有產品都提供售后服務。付款方式靈活。公司堅持“一站式"服務模式，為客戶全面解決實驗、生產、開發需求。公司整合國際與國內資源，加強網絡建設，提高公司內部運作效率，為客戶提供方便、快捷的服務。

7. 公司突出創新思維，提高工作效能，減低運作成本，為客戶提供優惠的價格。

葡萄糖6磷酸(6PG)測試盒